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非乙酰化CAMP ELISA试剂盒
对 cAMP 具有超亲和力,无需乙酰化处理即可检测,简化实验步骤,细胞和组织样本都适用,区别于市面传统试剂盒。
该试剂盒用于体外定量检测血清、血浆。组织匀浆,细胞裂解液,细胞培养上清,或其他相关生物液体中天然cAMP 浓度。
- 基于独特的小鼠单克隆cAMP抗体
- 市场唯一采用单克隆cAMP抗体的检测试剂盒(其他试剂盒均基于多克隆)
- 与多克隆cAMP抗体相比,该cAMP单抗对cGMP和ATP的选择性显著更高
- 避免了动物源多抗生产所伴随的批次间差异,从而保证了良好的重复性
非乙酰化CAMP ELISA试剂盒产品说明
| 灵敏度 | 21.2fmol/ml |
| 检测范围 | 0.08pmol/ml-250pmol/ml |
| 特异性 | 可检测样本中cAMP (环磷酸腺苷)的含量。且与其他类似物无明显交叉反应。 |
| 重复性 | 板内,板间变异系数均≦10% |
- 环磷腺苷酸(cAMP)和环磷鸟苷酸(cGMP)是在通过对特定蛋白激酶作用来调节细胞内能量代谢的过程中非常重要的第二信使分子。两者都富含于中枢神经系统当中,AMP参与较高的皮质功能,而cGMP参与光转导。cAMP是三磷酸腺苷(ATP)的衍生物 ,在多种不同生物体的细胞内介导cAMP依赖的信号转导通路。cAMP参与细胞代谢、分化、增殖的跨 膜调控机制在恶性生长中具有良好的 细胞抑制和调节体内平衡的作用。
- 目前商业化提供的一些cAMP检测试剂盒主要应用ELISA的方案 ,使用的是非亲和纯化的cAMP多克隆抗体.尽管具有灵敏性,这些多克隆抗体与ATP存在一定程度的交叉反应。基于ATP是cAMP生产的底物 很有必要找到一种能高特异性识别cAMP的抗体。
- NewEast Biosciences开发出了唯一的鼠单克隆抗体的cAMP ELISA 检测试剂盒。该单克隆抗体对cAMP的特异性比cAMP、ATP等类似的小分子高出108 倍以上。相较于其他的多克隆抗体cAMP试剂盒,纽斯特生物cAMP ELISA试剂盒能显著的提高其灵敏性和特异性 ,且能有效避免来自动物多克隆抗体的批次间差异 ,因此可以提供长久有效地可重复性定量检测。
- 纽斯特生物cAMP ELISA试剂盒能显著的提高其灵敏性和特异性,且能有效避免来自动物多克隆抗体的批次间差异 ,因此可以提供长久有效地可重复性定量检测。此外 ,其他ELISA试剂盒的多克 隆抗cAMP抗体与乙酰化cAMP的亲和力明显高于非乙酰化cAMP.本试剂盒的单克隆cAMP抗体与乙酰化或非乙酰化cAMP具有同样的亲和力。因此.纽斯特生物cAMP ELISA试剂盒中的样品和标准品不需要乙酰化处理 ,从而明显缩短了分析时间 ,有效避免了乙酰化过程中的有机试剂的使用 ,为大家提供了一个更安全.更健康的工作环境。
非乙酰化CAMP ELISA试剂盒实验原理及研究背景
- 本试剂盒利用竞争酶联免疫分析方法来测定细胞提取物或体外腺苷酸环化酶实验中的 cAMP 的水平。包被羊抗鼠多克隆抗体在酶标板上,细胞提取物或体外腺苷酸环化酶实验中的cAMP 与固定数量的标记辣根过氧化物酶的 cAMP 竞争性的结合抗 cAMP单克隆抗体,采用已知浓度的 cAMP 标准品来做标准曲线。用酶标仪 在 450 nm 波长处测 OD 值,cAMP 浓度与 OD450值之间呈反比,通过绘制标准曲线计算出样品中 cAMP 的浓度。
- cAMP作为独特的第二信使 ,可调节细胞对各种外源和内源信号分子的反应。它主要通过激活蛋白激酶、控制特定的离子通道、磷酸二酯酶调节细胞环核苷酸浓度以及激Epac(通过cAMP直接激活 蛋白交换)(3-6)来调节生理过程。通过腺苷酸环化酶可以实现ATP转化为cAMP。哺乳动物体内的主 要腺苷酸环化酶家族均是横跨膜的 ,具有9个亚型 ,且可通过G蛋白Gs或钙离子/钙调素(1)激活。另外 ,还有一种可溶性的腺苷酸环化酶 ,可以通过碳酸盐或Ca2 +调节7。
非乙酰化CAMP ELISA试剂盒组分
| Components | Description | Chemicals |
| cAMP Standard (100 µM) | 0.25 ml | 5,000 pmol/mL cAMP |
| HRP-cAMP Conjugate | 0.1 ml | cAMP Conjugate |
| cAMP Mouse Monoclonal antibody | 0.007 ml | Mouse Antibody |
| 10 x Wash Buffer | 15 ml | 0.1% Bovine Serum Albumin 0.05% Tween-20 |
| 1x Wash Buffer | 2 X 6 ml | 0.01% Bovine Serum Albumin 0.005% Tween-20 |
| Substrate A solution | 10 ml | 0.08% Urea-H2O2 0.1% Sodium benzoate |
| Substrate B solution | 10 ml | 1% DMSO 1% Acetone 20 mg per 100 ml, 3,3′,5,5′-Tetramethylbenzidine 0.3 g per 100 ml Citric acid |
| Neutralizing Reagent | 6 ml | 0.4 M Tris-HCl |
| Stop solution | 6 ml | 2M Sulfuric acid |
| Goat anti-Mouse IgG Microtiter Plate | Plastic Plate | Goat anti-Mouse antibody |
- 收到试剂盒后 ,若不立即使用 ,请按照标签说明存储在相应的温度。CAMP-HRP 浓缩液,及A,B显色液应避光保存。试剂盒所需自备物品
- 酶标仪(450 nm波长滤光片)
- 高精度移液器,EP管及一次性吸头:0.5-10μL, 2-20μL, 20-200μL, 200-1000μL
- 双蒸水或去离子水
- 吸水纸
- 加样槽
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