X-BCA 快速蛋白定量试剂盒

01 产品信息

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产品编号：X-BCA500

组分名称	规格
BCA 试剂 A(浅绿色)	50 mL
BCA 试剂 B	50 mL
即用标准品 X	2.5 mL

02 所需材料（自备）

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1. 96 孔透明酶标板;酶标仪(562 nm)；
2. 移液器及枪头；
3. 恒温水浴锅(60℃)。

03 实验前规划

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在96孔板上,预先规划｢标准品区｣和｢待测样本区｣，标准品建议采用3重复，样品2重复。

1. 向「标准品区」和「待测样品区」孔中，依次加入200μl BCA工作液；
2. 向「标准品区」加入即用型标准品X溶液0μl、5μl、10μl、15μl、20μl，吹打混匀2-3次；
3. 向「待测样品区」加入待测样品10μl，依次吹打混匀2-3次。

04 工作液配制

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根据上一步骤的实验规划:
工作液总体积= (标准品孔数+待测样本孔数+1)× 200 μL
试剂 A与B按照1:1混合,即得BCA工作液。(注意区别,其他品牌的一般为50：1)

05 加入BCA工作液

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向｢标准品区｣和｢待测样本区｣孔中,依次加入 200 μL BCA 工作液。

06 加入标准品和待测样品

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｢标准品区｣加入即用标准品 X溶液 0 μL、5 μL、10 μL、15 μL、20 μL,吹打混匀2-3次。｢在待测样品区｣加入待测样品10 μL, 依次吹打混匀2-3次(若样品珍贵,使用 X-RIPA UltraMix稀释以后进行测量)。

注: 稀释比例请牢记,最终计算得到的浓度是样本稀释后的浓度。

07  孵育

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将加样完成的酶标孔板封盖后，置于水浴条件下孵育：60℃孵育 15 分钟，或 37℃孵育 30 分钟，以充分进行显色反应。

08 吸光值检测

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孵育结束后(无需冷却),吸水纸吸去孔板板底水滴,使用酶标仪读取562 nm处吸光值(OD562)。

09 结果计算

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以标准品的 OD562(无需扣除空白点)值为纵坐标、对应的标准品蛋白浓度(0、2.5、5、7.5、10)mg/mL为横坐标绘制标准曲线,计算待测样品的实际蛋白浓度。

提示: 艾克生命团队重磅推出｢一键BCA微信小程序｣,一键实现待测样品蛋白定量和 wb 上样前稀释和配平方案计算, 无需繁琐excel公式计算。

10 注意事项

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1. 标准品X溶液无需稀释,为即用型；
2. 待测样品建议按照10 μL原液测试,想要更高准确度,可以按5 μL/10 μL/20 μL三平行测试；
3. 若待测样品非常珍贵,可以用X-RIPA UltraMix稀释以后进行测定；
4. BCA溶液为1:1混合,不同于市面上其他品牌的50:1。

11 储存方式

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常温储存。