人结肠癌类器官培养基套装

西瑞无限结肠癌类器官培养试剂盒是研究结直肠癌（CRC）的先进体外模型解决方案。本产品培养的类器官能够高度模拟结肠癌的肿瘤微环境，便于观察癌细胞的生长和增殖情况，可用于追踪肿瘤细胞在药物作用下的变化，筛选药物的效力与毒性，是相关研究的可靠工具。

人结肠癌类器官培养试剂盒包括：人结肠癌类器官基础培养基A及人结肠癌类器官培养添加物B，组分不单独售卖。

• 培养简单：即混即用的设计简化了实验流程，降低技术门槛，且培养基集成多种因子，无需添加其他因子和再优化；
• 扩增效率高：培养的类器官能够快速增长；
• 维持稳定传代：维持至少3代以上扩增，部分类器官每次传代可实现10代以上扩增；
• 稳定可靠：成分明确，批次间稳定性高，确保实验可重复性。

• 使用预冷的原代组织储存液浸泡新鲜提取的肿瘤组织，并置于4°C冰箱中暂时保存;
• 无菌条件下，将组织取出置于培养皿中，用预冷的PBS冲洗，重复清洗操作3次以上;
• 清洗后的原代组织转移至1.5mL离心管中，用手术剪刀将组织剪成1~3mm3的组织块;
• 将组织块转移至15mL离心管中，加入10mL原代组织消化液，37℃下消化组织15-45min﹙时间取决于组织来源和大小），消化过程中每隔10min轻柔吹打或震荡，同时观察组织消化情况;
• 消化结束后加入终止液终止消化，将组织和液体一起通过100μm的细胞筛网过滤以去除未消化组织;
• 离心收集细胞沉淀，根据沉淀中红细胞的数量判断是否需要加红细胞裂解液;
• （可选）红细胞裂解：离心管中加入1-2mL红细胞裂解液，室温孵育2min后加入终止液终止消化，后离心并弃上清，收集细胞沉淀;
• 根据细胞数量加入基质胶﹙密度控制：1x10⁵-1x10⁶ cells/mL﹚并重悬，将细胞-基质胶混合物滴加到24孔板中，尽量避免产生气泡，随后将细胞培养板放入37°C，5% CO₂ 的培养箱中孵育15-25min，使基质胶凝固;
• 基质胶凝固后，在胶滴周围小心加入700μL人胃癌类器官完全培养基。37℃，5%CO₂培养。

• 使用前，请将96mL基础培养基A与4mL培养基添加物B混合，即可获得100mL完全培养基，充分混匀后置于冰上备用;
• 如果不能一次性用完，请分装备用，避免反复冻融;
• 产品的分装、使用等操作需在无菌环境下进行;
• 本产品仅供科研使用，不得用于临床诊断或治疗。