hESC/iPSC 悬浮专用培养基套装(化学成分明确)

hESC/iPSC 悬浮专用培养基套装(化学成分明确)

IPSC进入悬浮时代,类器官培养事半功倍

¥2,250.00
  • 规格:500mL

SKU:XRiPSC-S-500 分类: 品牌:

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外胚层(前脑)
ipsc悬浮培养外胚层
中胚层(心脏)
外胚层(前脑)ipsc悬浮培养中胚层
内胚层(肝脏)
中胚层(心脏)ipsc悬浮培养内胚层

hESC/iPSC 悬浮专用培养基套装(成分明确)

本产品是专为多能干细胞的﹙hESC/iPSC﹚的大规模、高效率扩增
而设计的无微载体悬浮培养体系。本产品旨在克服传统贴壁培养
在扩增效率、均一性、成本及自动化方面的局限,为下游分化、
类器官构建及细胞治疗应用提供稳定、优质且经济的细胞来源。

可形成均一的细胞团(主要在200-300μm), 可直接进行3D分
化或者灵活切换到贴壁体系。

本品成分明确、无动物源成分和人源成分。

规格内毒素过滤细菌/霉菌储存有效期
基础培养基:496mL
添加剂:4mL
≤0.25 EU/mL<0.2μm未检出基础:2-8℃
添加剂:-20℃
12个月

产品亮点-hESC/iPSC 悬浮专用培养基套装

XR hESC/iPSC Suspension Expansion Medium Kit(CD)

  1. 支持从6孔板到生物反应器的胚胎干细胞或诱导多能干细胞的悬浮扩增。
  2. 高效扩增:同时培养96h后﹐ 悬浮培养在6孔板规模可产出超6×107的高活性细胞,远高于贴壁培养的1.5×107-2×107。
  3. 优越的多能性维持:悬浮培养10代以上的iPSC和胚胎干细胞H9均正常表达细胞表面蛋白标志物,并且成功诱导出的类器官均一性相比“贴壁-EB-诱导”模式有所提高。
  4. 降低培养成本与操作复杂度:无需使用昂贵的重组蛋白或基质胶进行包被。无微载体设计更易于实现自动化、规模化生产。
  5. 形成均一、健康的细胞团:培养生成的细胞簇大小均匀(主要分布在200-300μm),有效避免了大团块中心坏死问题。悬浮细胞团可直接进入分化流程。
  6. 悬浮培养体系可直接、平滑地过渡至3D分化(如类器官、球体培养),并且支持贴壁(2D)和悬浮(3D)培养的切换,适应不同下游应用场景。

悬浮培养扩增数据

西瑞ipsc悬浮培养基

方案一

48h
西瑞ipsc悬浮培养基
96h
48h西瑞ipsc悬浮培养基

使用Costar® 6-well plate (Ultra-low Attachment Surface)和XR hES/iPSC 悬浮培养基,对iPSC进行悬浮培养。轨道摇床﹙直径20mm,转速75rpm﹚,每孔接种6×105个iPS单细胞,3mL悬浮培养基﹙2×105细胞/mL﹚,每24h换液50%体积的培养基,在96h的培养结束时,平均每孔收获超1×107个iPS细胞。

西瑞ipsc悬浮培养数据

方案二

96h
西瑞ipsc悬浮培养方案
96h西瑞ipsc悬浮培养方案

使用ABLE 30 mL Disposable Bioreactor搭配XR hES/iPSC 悬浮培养基,对iPSC进行悬浮培养﹐﹙转速40rpm﹚,每个反应器接种3×106个iPS单细胞,30mL悬浮培养基,每24h换液50%体积的培养基,在96h的培养结束时,平均每孔收获超4×107个iPS细胞,略高于ABLE反应器技术数据中1×106/mL*30mL的细胞产量(搭配StemFitTM培养基)。

悬浮细胞的多能性及分化能力

取连续悬浮培养10代以上的iPSC和胚胎干细胞H9,对常见的多能干细胞表面蛋白标志物进行流式细胞术分析。分析结果
显示,两株多能干细胞均正常表达细胞表面蛋白标志物SSEA3和TRA-1-81。

图 1(A、B)为悬浮培养超过10代的一株iPSC P44,横轴FITC标记为SSEA3,横轴APC标记为TRA-1-81,对照绿色曲线为不添加抗体的空白细胞对照;(C、D)为悬浮培养超过10代的一株H9 P64,横轴FITC标记为SSEA3,横轴APC标记为TRA-1-81,可以看出虽然H9的SSEA3阳性表达量相比iPSC略低,但两株细胞在长期悬浮培养后仍保持了多能性标记的高表达。其中SSEA3抗体为Biolegend 330306 Alexa Fluor® 488 anti-human/mouse SSEA-3,TRA-1-81抗体为Biolegend 330706 Alexa Fluor® 647 anti-human TRA-1-81,均按照5uL/Test浓度进行了30min孵育。

取连续悬浮培养的iPSC细胞,在悬浮48或72h后,取iPSC细胞球直接诱导三胚层的分化,均能够成功诱导出对应的iPSC来源类器官,且类器官诱导的均一性相比“贴壁-EB-诱导”模式有所提高,说明连续的悬浮培养并未影响细胞的多能性。且诱导出的类器官状态均较好,这个同悬浮细胞的高活性以及成团簇生长特性有极大关系。悬浮培养方法的应用,从一定程度上减少了由于多能干细胞状态不佳导致的诱导失败或诱导效率不高的情况。

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