免疫显色试剂盒（通用4组分）

产品说明书

【产品名称】

免疫显色试剂盒（通用4组分）

【产品货号】

CSK1003-2mL/CSK1003-20mL/ CSK1003-100mL

【主要组成成分】

【预期用途】

该试剂仅供科研使用。主要用于免疫组织化学的显色反应。

【检测原理】

此试剂盒是利用抗体与切片中的靶抗原形成抗原抗体复合物，再通过HRP酶标抗小鼠/兔聚合物（以多聚氨基酸为骨架，辣根过氧化物酶与抗小鼠/兔IgG-Fab’片段形成的多聚合物）与抗原抗体复合物中的抗体结合，最后辣根过氧化物酶催化二氨基联苯胺（DAB）在抗原部位形成棕色沉淀，并可借助显微镜观察其颜色变化，从而在抗原抗体结合部位确定组织、细胞的结构。

【储存条件及有效期】

2~8℃储存，避免冰冻。有效期为12个月。

【检验方法】

1.检验所需仪器、设备

移液器、免疫组化油笔、计时器、干燥箱、孵育盒、染色架、盖玻片、光学显微镜、洗瓶。

2.溶液配制

DAB显色液：使用DAB底物缓冲液将DAB底物（20X）稀释20倍。避光存放，现配现用。

3.试验温度条件

室温，18~25℃

4.实验步骤

4.1脱蜡和水化

石蜡切片置于新鲜的二甲苯中，浸泡2次，10min/次，；

除去多余的液体后，置于无水乙醇中，浸泡2次，5min/次，；

除去多余的液体后，置于95%乙醇中，浸泡5min；

除去多余的液体后，置于85%乙醇中，浸泡5min；

自来水冲洗3次, 3min/次。

4.2抗原修复：参照一抗抗体说明书进行。

4.3加内源性过氧化物酶阻断剂

将抗原修复后的切片用自来水冲洗3次，3min/次，用油笔圈定玻片上的待测组织区域，TBS清洗液冲洗1次，3min/次；除去TBS清洗液，在样本区域加入80-100μL（试剂量视切片大小，以完全覆盖切片组织为宜，前后试剂量保持一致，下同）内源性过氧化酶封闭剂，室温孵育5min；TBS清洗液冲洗3次，3min/次。

4.4加抗体

除去TBS清洗液，加入80-100μL一抗，室温孵育60min；TBS清洗液冲洗3次，3min/次。

4.5加HRP酶标二抗聚合物

除去TBS清洗液，加入80-100μL酶标二抗聚合物，室温孵育30min。TBS清洗液冲洗3次，3min/次。

4.6显色

除去TBS清洗液，加入80-100μL新鲜配制的DAB显色液，室温孵育5min。

4.7复染

自来水冲洗，加80-100μL苏木素，室温孵育1-3min；自来水冲洗返蓝。

4.8脱水、透明、封片

置于85%乙醇中，浸泡2min；

置于95%乙醇中，浸泡2min；

置于无水乙醇中，浸泡2次,2min/次；

二甲苯透明，浸泡2次,2min/次；

中性树胶和盖破片封片。

4.9光学显微镜阅片

【检验方法的局限性】

1. 免疫组织化学试验中，试剂选取、样本固定、处理，切片准备及染色结果解释等都必须进过严格的专业培训；专业的操作人员、经过认证的实验室将有助于实验检测过程的标准化，从而减少由于外界因素造成的染色偏差。
2. 染色前组织的处理直接影响染色效果。不恰当的固定、冰冻、熔化、清洗、烘干、切片或被其他组织或液体污染都会造成假阳性、抗体定位不准确或假阴性结果。固定和包埋方法的不同或组织内部的不规则也可能造成异常的染色结果。
3. 过度或不足的复染都会影响结果的正确解释。
4. 该试剂盒仅对10%中性缓冲福尔马林固定石蜡包埋的组织进行了验证，不得用于其它样本类型或流式细胞检测等其它用途。

【注意事项】

1. 该试剂盒仅供科研使用。
2. 实验开始前，应仔细阅读说明书。
3. 该试剂必须是经过严格培训的专业人员在有效期内使用，如发现漏液、污染或变质，请勿使用。
4. 该试剂使用应采取适当的防护措施，避免试剂同皮肤和眼睛接触，禁止口吸试剂，若皮肤、粘膜等身体部位接触该试剂，及时使用大量水冲洗。
5. 抗原修复、孵育时间、温度条件或应用其他方法均可能导致错误结果。
6. 样本室温保存时，应在封存7天内染色。否则会因为时间长久，导致组织中抗原退变产生假阴性结果。
7. DAB有潜在致突变作用，在使用过程中应特别注意安全防护措施外，对其使用后的废液存放和去毒性处理也应符合相关法律法规要求。
8. 该试剂是否应用于非福尔马林固定组织还未得到证实。
9. 【基本信息】生产企业：赛诺特生物技术（苏州）有限公司联系地址：苏州市高新区富春江路188号7号楼701室联系方式：0512-66616037【生产日期及使用期限】详见标签

免疫显色试剂 . 专利技术

在免疫组化技术中，二抗一直是技术壁垒最高的产品，赛诺特生物在美国组建高精尖研发团队，通过5年的努力，突破了微聚合物骨架、HRP层叠、Fab'标记、偶联化学四大核心技术。

2018年新型MicroStacker™微聚合物层叠法二抗检测试剂盒成功上市， 并获得国家发明专利，成为国内首创微聚合物骨架二抗，打破进口垄断。

MicroStacker™通用型

鼠、兔通用免疫组化显色试剂盒

微聚合物结构紧凑，穿透力强，灵敏度更高

采用Fab'抗体片段标记，避免非特异性着色

采用新型化学偶联技术，试剂更稳定

适用于石蜡组织中鼠源和免源抗体的手工免疫组化检测

MicroStacker™增强型

鼠、兔通用二步增强法

与通用型检测系统相比，通过特别设计获得更高灵敏度，并且增加一步放大剂，进一步扩增一级抗体信号；适用于石蜡组织中鼠源和免源抗体的手工免疫组化检测；适用于表达量低的抗原，亲和力低的抗体

MicroStacker™ RX多聚HRP酶标二抗聚合物

染色效果对比

COMPARE

研发人员通过在微骨架上实现过氧化物酶和抗体的分层有序组装，以及对多聚物中各组分比例和结构组成的精确调控和优化，实现了染色较高的灵敏度和特异度。本款手工免疫显色试剂，分为鼠免通用型二抗，羊抗鼠二抗和羊抗兔二抗。

1、本品广泛应用于石蜡组织切片和冰冻切片的免疫组化染色。
2、适用于鼠源一抗和(或)免源一抗的检测放大。

MicroStacker™二抗聚合物特点：

• 提升灵敏度:采用微聚合物骨架和HRP酶层叠技术，更小骨架结构，以及酶和抗体分层堆积，使得多聚物结构更加紧凑，位阻小，穿透力强，显著提升染色灵敏度。
• 提升特异性:Fab’片段标记，体积更小，避免了因Fc片段造成的非特异性染色。非生物素检测系统，避免因组织中内源性生物素造成的背景染色。
• 提升稳定性:采用新型偶联化学，酶和抗体组分比例精确可控，多聚物结构也更加稳定，使得染色结果更加稳定可靠。

免疫组化显色试剂盒订货信息

货号	名称	规格	组分	目录价
CSK1003-2mL	免疫显色试剂盒（通用4组分）	20次	内源性过氧化物酶封闭剂 HRP酶标记山羊抗鼠/兔试剂 DAB底物（20X） DAB底物稀释缓冲液	600
CSK1003-5mL	免疫显色试剂盒（通用4组分）	50次	内源性过氧化物酶封闭剂 HRP酶标记山羊抗鼠/兔试剂 DAB底物（20X） DAB底物稀释缓冲液	1375
CSK1003-10mL	免疫显色试剂盒（通用4组分）	100次	内源性过氧化物酶封闭剂 HRP酶标记山羊抗鼠/兔试剂 DAB底物（20X） DAB底物稀释缓冲液	2675
CSK1003-20mL	免疫显色试剂盒（通用4组分）	200次	内源性过氧化物酶封闭剂 HRP酶标记山羊抗鼠/兔试剂 DAB底物（20X） DAB底物稀释缓冲液	5031
CSK1003-100mL	免疫显色试剂盒（通用4组分）	1000次	内源性过氧化物酶封闭剂 HRP酶标记山羊抗鼠/兔试剂 DAB底物（20X） DAB底物稀释缓冲液	17063