人肺癌类器官培养基套装

西瑞无限肺癌类器官培养试剂盒是为各类肺癌组织衍生类器官培养而精心设计的专业工具。本试剂盒提供了一套标准化的培养方案，能够高效支持肺癌细胞在体外形成三维类器官，并保持其肿瘤特异性，可用于疾病建模、机制研究、精准医疗、药敏药筛等方面。

人肺癌类器官培养试剂盒包括：人肺癌类器官基础培养基A及人肺癌类器官培养添加物B，组分不单独售卖。

• 培养简单：即混即用的设计简化了实验流程，降低技术门槛，且培养基集成多种因子，无需添加其他因子和再优化；
• 扩增效率高：培养的类器官能够快速增长；
• 维持稳定传代：维持至少3代以上扩增，部分类器官每次传代可实现10代以上扩增；
• 稳定可靠：成分明确，批次间稳定性高，确保实验可重复性。

• 使用预冷的原代组织储存液浸泡新鲜提取的肿瘤组织，并置于4°C冰箱中暂时保存;
• 无菌条件下，将组织取出置于培养皿中，用预冷的PBS冲洗，重复清洗操作3次以上;
• 清洗后的原代组织转移至1.5mL离心管中，用手术剪刀将组织剪成1~3mm3的组织块;
• 将组织块转移至15mL离心管中，加入10mL原代组织消化液，37℃下消化组织15-45min﹙时间取决于组织来源和大小），消化过程中每隔10min轻柔吹打或震荡，同时观察组织消化情况;
• 消化结束后加入终止液终止消化，将组织和液体一起通过100μm的细胞筛网过滤以去除未消化组织;
• 离心收集细胞沉淀，根据沉淀中红细胞的数量判断是否需要加红细胞裂解液;
• （可选）红细胞裂解：离心管中加入1-2mL红细胞裂解液，室温孵育2min后加入终止液终止消化，后离心并弃上清，收集细胞沉淀;
• 根据细胞数量加入基质胶﹙密度控制：1x10⁵-1x10⁶ cells/mL﹚并重悬，将细胞-基质胶混合物滴加到24孔板中，尽量避免产生气泡，随后将细胞培养板放入37°C，5% CO₂ 的培养箱中孵育15-25min，使基质胶凝固;
• 基质胶凝固后，在胶滴周围小心加入700μL人胃癌类器官完全培养基。37℃，5%CO₂培养。

• 使用前，请将96mL基础培养基A与4mL培养基添加物B混合，即可获得100mL完全培养基，充分混匀后置于冰上备用;
• 如果不能一次性用完，请分装备用，避免反复冻融;
• 产品的分装、使用等操作需在无菌环境下进行;
• 本产品仅供科研使用，不得用于临床诊断或治疗。