小鼠肺类器官培养基套装

西瑞无限小鼠肺类器官培养试剂盒是一款专为用于构建、维持和扩增小鼠肺类器官的细胞培养基产品。本产品由我司自主研发，不含血清，成分明确。

小鼠肺类器官完全培养基包括：小鼠肺类器官基础培养基及添加物，组分不单独售卖。

• 解剖C57小鼠，用手术剪刀取出肺。将肺转移到培养皿中，用预冷的PBS冲洗3次。
• 将清洗后的肺转移至1.5mL离心管中，用手术剪刀将肺组织剪成小组织块。
• 将小组织块转移至15mL离心管中，后加入10mL肺组织消化液，在37°C下消化组织15-45min（时间取决于组织来源和大小）。消化过程中每隔10min轻柔吹打或震荡。
• 消化结束后加入终止液终止消化，将组织和液体一起通过100μm细胞筛过滤。
• 离心收集细胞沉淀。根据沉淀中红细胞的数量判断是否进行红细胞裂解。
• ﹙可选﹚红细胞裂解：离心管中加入2mL红细胞裂解液，室温孵育2min后加入终止液终止消化。后离心收集细胞沉淀。
• 根据细胞数量加入基质胶﹙1x10⁵-1x106 cells/mL基质胶﹚。将细胞-基质胶混合物滴加到24板孔中﹙每滴约30-40μL﹚。将培养板放入37°C, 5% CO2培养箱中固化15-25min，使基质胶凝固。
• 基质胶完全凝固后，在胶滴周围小心加入700μL预热的小鼠肺类器官培养基。37℃，5% CO₂条件下进行培养。

P 0 Day 0

P 0 Day 3

P 0 Day 7

P 1 Day 7

图1-4：产品3天内形成类器官，稳定7天内可以传代

图5：标志物特异性表达高，类器官来源正确，可长期进行培养