hESC/iPSC专用无蛋白冻存液

专为多能干细胞（iPSC/ESC）冻存而设计

西瑞无限PluriCryo是专为多能干细胞（iPSC/ESC）冻存而设计的冻存液产品。它通过提供细胞在冻存过程所需保护性成分和多能干细胞特殊营养物质，减少多能干细胞在长期冻存和解冻过程中的应激损伤，使多能干细胞在冻存后快速恢复，并维持分化潜能；

PluriCryo中不添加人或动物源成分，无蛋白和小分子化合物，最大程度降低冻存多能干细胞接触异源物质或细胞毒性物质，维持细胞多能性。

• 二甲基亚砜（DMSO）含量10%（v/v）
• 全药典成分，不含动物源成分，无蛋白类成分
• 细胞培养级原料，低内毒素
• 适用细胞—— iPSC、胚胎干细胞
• 支持单细胞或团块消化冻存

• 多能干细胞培养结束后，采用单细胞消化法或团块消化法将细胞从培养孔板上分离，将细胞悬液转移至离心管（细胞悬液中可以加入10μM Y27632，维持细胞活性），200g、 3-4min离心，弃掉上清液；
• 缓慢加入PluriCryo细胞冻存液（一般一个6孔板的单孔，冻存一支细胞 ），用冻存液轻轻将细胞沉淀吹散、混匀；对于团块消化法，尽量减少吹打次数至3-4次，再转移至冻存管中；
• 推荐使用程序降温盒将细胞转移到-80℃冰箱，-80℃冰箱适合短期保存，需长期保存的细胞可在-80℃冰箱冷冻12h后转移至液氮（-196℃）
• 复苏时，可采用细胞复苏仪或37℃水浴解冻，将细胞和冻存液转移至离心管，加入3倍体积以上iPSC/ESC培养基（培养基中可以加入10μM Y27632，维持细胞活性），再通过离心去除冻存液。

a

iPSC P20 复苏 24h（单细胞冻存）

P21 传代后72h

b

H9 P30 复苏 24h(团块冻存)

P31 传代后96h

说明

• a.PluriCRYO能够在单细胞冻存条件下，在12个月的冻存后，活率维持在80%以上；复苏时加入10μMY-27632，能够在1代后恢复正常克隆形态
• b.ESC（H9）团块消化后冻存12个月，活率可以维持在80%以上，复苏后在24h换液去除死细胞，在48h时传代，连续培养3-4天克隆形态恢复正常